【化工儀器網 時事熱點】如果要問生物學領域，誰是不可不提的人物，那被尊為“PCR之父”凱利·穆利斯一定是其中一個。《紐約時報》 曾經評價凱利·穆利斯說：高度創新，非常重要，將生物學劃分為了兩個時代：PCR前時代和PCR后時代
 
　　1985年，凱利·穆利斯發明了PCR技術，并在1993年憑借這一方法獲得了諾貝爾獎。“生命科學可以被分為兩個時代：一個沒有PCR，一個有PCR”這一說法或許有些夸張，但也反映了該領域對PCR技術的高度認可。可以說，PCR技術的發明，極大的推進了分子生物學、生物化學、分子生物學、遺傳學、醫學、法醫學等多個學科的發展進程。
 
　　2019年8月7日，凱利·穆利斯因病與世長辭，享年74歲。
 
　　PCR技術 生命科學領域里程碑似的發明
 
　　PCR即聚合酶鏈式反應，是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術。簡單來說，PCR技術可以被看作是生物體外的特殊DNA復制，其特性是依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物，通過變性-退火-延伸三個基本反應步驟，將微量的DNA大幅增加。
 
　　該技術可以在幾小時中將需要檢驗、分析的樣品基因擴增放大幾百萬倍。因此，人們可以利用微量的血跡、細胞、生物組織擴增出足夠多的DNA，用于后續研究。
 
　　PCR技術改變了生物化學、分子生物學等學科的發展，是支撐現代分子生物學發展的一塊重要基石，具有劃時代意義。如今，PCR技術已經被廣泛地應用于生命科學研究、食品衛生、醫療、法醫及環境監測等諸多方面，尤其是在感染性疾病的診斷中有十分重要的作用。
 
　　常見的PCR技術
 
　　免疫PCR是一種抗原檢測系統，其工作過程是將一段已知序列的DNA片段標記到抗原抗體復合物上，再用PCR方法將這段DNA擴增，然后用常規方法檢測PCR產物。免疫PCR結合了免疫反應和PCR的特點，集PCR的高靈敏度與抗原抗體反應的特異性于一體，具有常規PCR和普通ELAS無法比擬的優勢。
 
　　反向PCR又稱為染色體緩移，可用于研究與已知DNA區段相連接的未知染色體序列。反向PCR技術在檢測病毒、建立基因組步移文庫及研究基因的上游調控元件等方面優勢明顯，但它需要從許多酶中選擇一種合適的限制性內切酶進行酶切，且大多數真核基因組含有大量中度和高度重復序列，因此擴增效果常常會受到影響。
 
　　原位PCR技術能將PCR高效擴增與原位雜交的細胞定位相結合，在組織細胞水平原位檢測單拷貝的特定DNA或RNA序列。該技術是臨床診斷領域與細胞學科里的一項有較大潛力的新技術，它既能分辯鑒定帶有靶序列的細胞，又能標出靶序列在細胞內的位置，于分子和細胞水平上研究疾病的發病機理和臨床過程及病理的轉歸有重大的實用價值。
 
　　實時PCR又稱熒光定量PCR，是指在PCR反應體系中運用熒光能量傳遞技術，并在普通PCR儀設計基礎上增加熒光信號激發和采集系統和計算機分析處理系統，形成具有熒光定量PCR功能的儀器。該技術巧妙地核酸擴增、雜交、光譜分析和實時檢測技術結合在了一起，提高了儀器靈敏度，也有利于數據收集。
 
　　這些技術都是在PCR原理的基礎上逐漸發展起來的新技術。從凱利·穆利斯時代到如今，PCR技術不斷經歷創新和改進，為生命科學領域提供了重要的技術支撐。而在今后，我們還將在PCR技術的引導下，進行更多的研究，探尋更多的生命奧秘。
 
　　偉人已去，功績永存。
 
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